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紫外交聯(lián)儀UCL-3500用于RecA突變篩選

作者:上海峰志儀器 時間:2022-11-11 13:09:30瀏覽714 次

信息摘要:

即讓缺失recA基因的菌株在紫外交聯(lián)儀下面照射,沒有缺失的會通過自己修復(fù)而存活,缺失的則死亡。

紫外交聯(lián)儀UCL-3500在RecA突變篩選中的應(yīng)用

RecA突變體篩選:即讓缺失recA基因的菌株在紫外交聯(lián)儀(jiaolianyi)下面照射,沒有缺失的會通過自己修復(fù)而存活,缺失的則死亡。

RecA是大腸桿菌中recA基因座的產(chǎn)物,具有雙重功能,能激活蛋白酶并能改變單鏈DNA分子。蛋白酶-激活活性控制SOS 反應(yīng);核酸酶活性涉及重組修復(fù)途徑。

RecA recA基因產(chǎn)物具有三種生物化學(xué)活性:重組活性,單鏈DNA結(jié)合活性和ATP酶活性。

RecA蛋白是一種形如纖維,每次通過初形成單體進(jìn)行伸長和收縮活動的蛋白,在修復(fù)受損DNA的過程中發(fā)揮重要作用。

是recA基因的產(chǎn)物,分子量約38 000D,為含4個亞基的四聚體。即使DNA分子有斷裂或“空隙”,兩個DNA分子也不一定重組。必須有推動重組反應(yīng)的酶存在,重組才能進(jìn)行。在這些酶中主要的是RecA蛋白,它能促使兩個同源DNA分子的堿基配對,形成雜種分子。

反之,兩條完整的同源雙鏈螺旋DNA,即使和RecA蛋白一起混合,也不會發(fā)生重組反應(yīng)。RecA蛋白能特異地識別單鏈DNA,并能將之與同源雙螺旋中的互補順序“退火”,同時將另一條鏈排擠出去,形成所謂D環(huán)(D-LOOP)。

RecA蛋白是一種多功能蛋白質(zhì),它參與大腸桿菌的同源重組途徑,有單體和多聚體兩種形式。多聚體由單體在單鏈DNA上從5′→3′方向組裝而成。

3紫外交聯(lián)儀UCL-3500

RecA的主要功能包括:

1.促進(jìn)2個DNA分子之間鏈的交換;

2.作為共蛋白酶促進(jìn)LexA 阻遏蛋白的自我水解

RecA蛋白在同源重組的具體作用分為3個階段:

1.RecA的個DNA結(jié)合位點(初級位點)與單鏈DNA結(jié)合,包被DNA,形成蛋白質(zhì)-DNA絲狀復(fù)合物;

2.RecA的第二個DNA結(jié)合位點(次級位點)與1個雙鏈DNA分子結(jié)合,形成三鏈DNA中間體,隨后單鏈DNA侵入雙鏈DNA,尋找同源序列;

3.RecA催化鏈交換,由被RecA包被的單鏈DNA從5′→3′方向取代雙鏈DNA分子之中的同源舊鏈,形成異源雙鏈,并發(fā)生分叉遷移。

為什么UCL-3500紫外交聯(lián)儀深受科研工作者的喜愛?

  1. UCL-3500內(nèi)置有高精度紫外線傳感器,能夠準(zhǔn)確計量紫外輻照能量。

  2. 安裝六根15w 紫外線燈管,輻照強度高,縮短實驗時間。

  3. 大面積輻照室,能夠同時進(jìn)行多組實驗。

  4. 鋁合金輻照腔,散熱快,輻照腔溫度變化小,滿足照射細(xì)胞實驗需求。

  5. 保修時間長,國內(nèi)有維修站,維修便捷。

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