紫外光與紫外交聯(lián)儀的應(yīng)用

紫外線是100-400nm之間電磁波譜的一部分。如表1所示，紫外光譜分為三類(lèi)，UVA，UVB和UVC。在地球上，UVC被大氣中的分子氧阻擋，但UVA和UVB很容易傳播到地球表面。經(jīng)歷過(guò)曬傷的人可以證明紫外線的危險(xiǎn)力量。雖然紫外線可能是有害的，從直接應(yīng)用到衛(wèi)生設(shè)施，再到我們對(duì)紫外線如何影響我們生物學(xué)的基本了解，它有助于改善人類(lèi)健康。

表 1.紫外線波長(zhǎng)。

*耶拿分析不生產(chǎn)真空紫外線產(chǎn)品

紫外線已被用于破壞空氣中的微生物，防止表面上微生物的生長(zhǎng)以及液體滅菌超過(guò)120年的應(yīng)用中。

例如，自1877年以來(lái)，人類(lèi)一直使用紫外線進(jìn)行食品保存/滅菌。1;紫外線在20世紀(jì)30年代開(kāi)始在手術(shù)室中使用，以對(duì)空氣進(jìn)行2;自20世紀(jì)初以來(lái)，紫外線已被用于對(duì)飲用水進(jìn)行斷斷續(xù)續(xù)的3.

在前面提到的應(yīng)用中，使紫外線具有有效性的相同特性使其對(duì)生物有機(jī)體具有危險(xiǎn)性。在紫外線照射時(shí)，在分子水平上，核酸鏈中的相鄰嘧啶可以發(fā)生二聚化，這主要發(fā)生在胸腺嘧啶堿之間4–6.

近100年來(lái)，研究人員利用紫外線的這種特性作為研究基因突變的工具。

事實(shí)上，是紫外線誘導(dǎo)的，而不是X射線誘導(dǎo)的8突變將與赫爾曼·穆勒（Herman Muller）1928年具有里程碑意義的蒼蠅實(shí)驗(yàn)有關(guān)，如果早期利用紫外線誘變特性的嘗試成功。7這些后來(lái)為他贏得了1946年的諾貝爾獎(jiǎng) - 畢竟，在他職業(yè)生涯的后期，紫外線成為他實(shí)驗(yàn)室的流行策略。9–16.

然而，研究人員遲遲未能確定產(chǎn)生誘變特性的紫外線的佳波長(zhǎng)（即254nm或UVC）。研究人員發(fā)現(xiàn)，紫外線在滴定后的蛋白質(zhì)溶液中產(chǎn)生凝固物。17,18.這是單獨(dú)完成的，大約在穆勒具有里程碑意義的工作之前十年。

后來(lái)，蛋白質(zhì)研究人員將了解產(chǎn)生這種凝固的潛在機(jī)制是二硫橋的破壞和色氨酸殘基的修飾。19.總之，這些發(fā)現(xiàn)為基于紫外線的細(xì)胞和分子生物學(xué)及其他領(lǐng)域的應(yīng)用鋪平了道路。

自1993年以來(lái)，耶拿分析公司一直在使用UVA、UVB和UVC光制造UVP紫外交聯(lián)儀，以涵蓋一系列應(yīng)用，這些應(yīng)用總結(jié)在圖1中。

使用Textspresso的Pub Med Central的UVP紫外交聯(lián)儀的應(yīng)用摘要。我們使用Textspresso20開(kāi)采Pub Med Central，以識(shí)別UVP CL-3000紫外交聯(lián)儀的獨(dú)特命中率。我們確定了 212 個(gè)匹配項(xiàng)，為簡(jiǎn)單起見(jiàn)，這些命中數(shù)被分類(lèi)為廣泛的類(lèi)別。

圖 1. 使用Textspresso的Pub Med Central的UVP紫外交聯(lián)儀的應(yīng)用摘要。我們使用Textspresso開(kāi)采了Pub Med Central。20識(shí)別UVP紫外交聯(lián)儀的獨(dú)特命中率。我們確定了 212 個(gè)匹配項(xiàng)，為簡(jiǎn)單起見(jiàn)，這些命中數(shù)分為大類(lèi)。

這些應(yīng)用包括：

光穩(wěn)定性驗(yàn)證

突變生物學(xué)（生存測(cè)定、紫外線誘導(dǎo)的突變、應(yīng)激試驗(yàn)）

聚合物固化（例如甲基丙烯酸酯樹(shù)脂、水凝膠）

膜交聯(lián)（北/南印跡，EMSA）

微生物失活（例如細(xì)菌、真菌、病毒）

雙分子交聯(lián)（PAR-CLIP-seq，pBpa，CLIP-seq，iCLIP-seq，sulfo-SDA，psoralen）

這些應(yīng)用依賴(lài)于可重復(fù)的高強(qiáng)度紫外線劑量。耶拿分析的新型號(hào)是UVP紫外交聯(lián)儀CL-3000，如圖2A所示。它采用內(nèi)置輻射計(jì)設(shè)計(jì)，該輻射計(jì)根據(jù)NIST可追溯標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行校準(zhǔn)，以確保無(wú)論何時(shí)何地，劑量一致。

此外，CL-3000可以產(chǎn)生高達(dá)10 J / cm的累積劑量2.通過(guò)將UV源和反射外殼靠近樣品，可以實(shí)現(xiàn)高度均勻的照明（圖2B和2C）。

照明表面的中心為6.0%，而整個(gè)照明表面的變化系數(shù)為17.3%。與Analytik Jena的儀器一樣，終用戶的安全至關(guān)重要，因此紫外交聯(lián)儀具有安全聯(lián)鎖功能，可防止意外的紫外線照射。

配備 254 nm UVC 燈泡的 Analytik Jena UVP 紫外交聯(lián)儀的均勻性。

A） UVP CL-3000 紫外交聯(lián)儀的輪廓圖像。

B） 以 mJ/cm2 為單位的集成輻射計(jì)讀數(shù)位置圖，以及總照明面（總 CV）和照明面中心（中心 CV）的尺寸和報(bào)告變異系數(shù) （CV） 計(jì)算方法。C）輻射計(jì)讀數(shù)的箱須圖摘要。總簡(jiǎn)歷：

圖 2.配備 254 nm UVC 燈泡的 Analytik Jena UVP 交聯(lián)劑的均勻性。A） UVP CL-3000 交聯(lián)劑的輪廓圖像。B） 以 mJ/cm 為單位描繪集成輻射計(jì)讀數(shù)位置的圖表2具有總照明表面（總 CV）和照明表面中心（中心 CV）的尺寸和報(bào)告變異系數(shù) （CV） 計(jì)算。C）輻射計(jì)讀數(shù)的箱須圖摘要。總 CV： 平均值 = 104.9， SD = 18.16;中心 CV：平均值 = 117.9，SD = 7.1。我們建議用戶將樣品放在照明表面的中心。放置在中心的樣品將至少接收輸入能量劑量。如果用戶想將樣品放在前面和后面的位置，我們建議購(gòu)買(mǎi)UVP 254 nm輻射計(jì)（P / N 97-0015-02）和傳感器（97-0016-01）來(lái)校準(zhǔn)劑量。

操作耶拿紫外交聯(lián)儀CL-3000

Analytik Jena UVP紫外交聯(lián)儀CL-3000能夠以時(shí)間或通量/劑量的形式進(jìn)行用戶輸入，單位為mJ / cm2.鑒于環(huán)境變量和燈泡的年齡會(huì)影響紫外線輸出，建議用戶推遲進(jìn)入通量而不是時(shí)間。用戶將發(fā)現(xiàn)兩者都用于科學(xué)文獻(xiàn)。

用戶只需轉(zhuǎn)換為 mJ/cm2如果報(bào)告了流量，則這是用于此儀器輸入的測(cè)量單位。一個(gè)轉(zhuǎn)換示例可以在表 2 的 Fluence 下看到。

如果報(bào)告通量率，通常以 μW/cm 為單位2，此值將伴隨曝光時(shí)間。用戶必須將流量率轉(zhuǎn)換為mW /cm2，示例轉(zhuǎn)換可以在表 2 的“通量率”下看到。

此外，用戶必須將曝光時(shí)間轉(zhuǎn)換為秒（例如，10 分鐘 = 600 秒）。下面顯示了示例方案和計(jì)算。

Table 2. 紫外能量單位轉(zhuǎn)換

*文獻(xiàn)中的值常報(bào)告為以mJ / cm為單位的通量2或 J/m2.在某些情況下，用戶報(bào)告通量率（例如 μW/cm2），在這種情況下，用戶應(yīng)使用公式1來(lái)確定通量（或劑量）。

Fluence Rate (mW/cm2)* Time(sec) = Fluence/Does (mJ/cm2)

1 mW/cm2 * 600 sec = 600 (mJ/cm2)

示例方案和計(jì)算

一名研究人員將甲型流感病毒暴露在1000 uW/cm210分鐘。將報(bào)告的紫外線劑量轉(zhuǎn)換為mJ /cm2.

樣品的放置

建議用戶將樣品放在CV= 6%的照明表面中心（圖2B，2C）。放置在中心的樣品將接收小的能量劑量。由于邊緣效應(yīng)，放置在后部和前面位置的樣品將接收到小于輸入劑量的樣品。

如果用戶想要校準(zhǔn)邊緣的紫外線劑量，則應(yīng)購(gòu)買(mǎi)UVP 254nm輻射計(jì)（P / N 97-0015-02）和傳感器（97-0016-01）。這是為了在儀器的照明表面上確定低的紫外線劑量。

例如，圖2B將前面和右邊的位置顯示為低劑量（78.18 mJ/cm）2） 時(shí) 100 毫焦/厘米2已輸入。因此，為了考慮邊緣效應(yīng)，用戶可以考慮輸入更高的劑量（例如125 mJ / cm2).

CL-3000紫外交聯(lián)儀的技術(shù)數(shù)據(jù)：

配件訂貨編號(hào)：

關(guān)于美國(guó)耶拿分析公司

耶拿分析是分析測(cè)量技術(shù)和生命科學(xué)領(lǐng)域儀器和產(chǎn)品的供應(yīng)商。其產(chǎn)品組合包括現(xiàn)代化的分析技術(shù)和完整的系統(tǒng)，用于生命科學(xué)領(lǐng)域的生物分析應(yīng)用。全面的實(shí)驗(yàn)室軟件管理和信息系統(tǒng)（LIMS）、服務(wù)產(chǎn)品以及特定于設(shè)備的耗材和一次性用品（如試劑或塑料制品）完善了集團(tuán)廣泛的產(chǎn)品范圍。

關(guān)于生命科學(xué)

生命科學(xué)產(chǎn)品領(lǐng)域展示了Analytik Jena AG的生物技術(shù)能力。我們?yōu)樽詣?dòng)化整體和分子診斷提供廣泛的產(chǎn)品范圍。我們的產(chǎn)品專(zhuān)注于為您提供實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的質(zhì)量和可重復(fù)性。這肯定會(huì)減輕您的日常工作，并以某種方式加快您的工作流程。我們一起在整個(gè)實(shí)驗(yàn)室工作過(guò)程中為您提供支持。此外，我們還提供定制的解決方案，并能夠使我們的產(chǎn)品適應(yīng)您的需求。用于制藥行業(yè)的自動(dòng)化高通量篩選系統(tǒng)也是該領(lǐng)域廣泛產(chǎn)品組合的一部分。

關(guān)于分析儀器

耶拿分析在開(kāi)發(fā)高性能精密分析系統(tǒng)方面有著悠久的傳統(tǒng)，其歷史可以追溯到Ernst Abbe和Carl Zeiss的發(fā)明。我們已發(fā)展成為全球具創(chuàng)新性的分析測(cè)量技術(shù)制造商之一。我們的分析儀器業(yè)務(wù)部門(mén)在光譜學(xué)、總和參數(shù)和元素分析領(lǐng)域提供卓越的能力。我們?yōu)槲覀兊暮诵母?jìng)爭(zhēng)力感到自豪，我們?yōu)榭蛻籼峁?0年的長(zhǎng)期保修，以確保我們的高性能光學(xué)器件。

關(guān)于實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化

憑借超過(guò)25年的市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)，Analytik Jena及其CyBio產(chǎn)品線是高質(zhì)量液體處理和自動(dòng)化技術(shù)的領(lǐng)先供應(yīng)商。在制藥和生命科學(xué)行業(yè)，我們的產(chǎn)品在精度、可靠性、穩(wěn)健性和簡(jiǎn)單性方面享有高的聲譽(yù)。此外，自動(dòng)化團(tuán)隊(duì)設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和安裝完全自動(dòng)化的系統(tǒng)，以滿足客戶的應(yīng)用、吞吐量和容量要求。從獨(dú)立的CyBio Well到完全定制的機(jī)器人系統(tǒng)，我們非常謹(jǐn)慎地處理您的化合物，生物分子和細(xì)胞。

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