上海峰志儀器有限公司現(xiàn)貨供應(yīng)便攜式熒光蛋白激發(fā)光源,能夠觀察GFP、YFP、RFP在種子、愈傷、葉片、根系以及老鼠、斑馬魚上的表達(dá)。
綠色熒光蛋白(GreenFluorescent Protein,簡(jiǎn)稱GFP)是在美國(guó)西北海岸所盛產(chǎn)的一種名為Aequorea victoria的水母中發(fā)現(xiàn)的一種可以發(fā)出綠色熒光的蛋白質(zhì)。GFPzui早是在1962年由日本科學(xué)家下村修發(fā)現(xiàn),是由238氨基酸組成的單體蛋白質(zhì),蛋白分子量約為27kD。GFP的晶體結(jié)構(gòu)顯示,蛋白質(zhì)中央是一個(gè)圓柱形水桶樣結(jié)構(gòu),長(zhǎng)420nm,寬240nm,由11個(gè)圍繞中心α螺旋的反平行β折疊組成,桶的頂部由3個(gè)短的垂直片段覆蓋,底部由一個(gè)短的垂直片段覆蓋,對(duì)熒光活性很重要的生色團(tuán)則位于桶的大空腔內(nèi)。實(shí)驗(yàn)表明GFP熒光產(chǎn)生的前提是桶狀結(jié)構(gòu)完整性,去除N端6個(gè)氨基酸或C端9個(gè)氨基酸,GFP均會(huì)失去熒光。原因是GFP生色團(tuán)的形成效率較低,而且形成過程受外界環(huán)境影響較大。
GFP主要使用什么波段的激發(fā)光?你觀察到得熒光是什么顏色?
GFP在藍(lán)光或紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。綠色熒光蛋白基因是目前應(yīng)用的報(bào)告基因之一,檢測(cè)方便,只需激發(fā)光源,不需任何底物或輔助因子;材料可活體觀測(cè),無(wú)需預(yù)處理;植物本身無(wú)綠色熒光,不會(huì)有假陽(yáng)性。因此,它目前在動(dòng)物、植物、微生物的研究中已得到廣泛的應(yīng)用。
植物病毒表達(dá)載體(GFP或eGFP,RFP),農(nóng)桿菌侵染植株后,如果要觀察GFP發(fā)光,需要選用LUYOR-3415RG激發(fā)光源來(lái)照射植物,同時(shí)需要佩戴美國(guó)路陽(yáng)專用的熒光觀察眼鏡,即可觀察到明亮的GFP熒光。LUYOR-3415RG的雙波段光源能夠激發(fā)GFP,eGFP和RFP,無(wú)論是綠色熒光蛋白還是增強(qiáng)型綠色熒光蛋白以及紅色熒光蛋白,LUYOR-3415RG均能夠激發(fā)出明亮的熒光,如果需要拍照,需要選用路陽(yáng)專用遮光片才可以拍到熒光。路陽(yáng)中國(guó)地區(qū)免費(fèi)請(qǐng)根據(jù)網(wǎng)頁(yè)底部聯(lián)系方式聯(lián)系:4006-254-365.也可免費(fèi)申請(qǐng)樣機(jī)試用。
GFP變體的激發(fā)和發(fā)射數(shù)據(jù)
GFP Variant | Excitation max (nm) | Emission max (nm) |
wtGFP | 395 | 509 |
GFPuV | 395 | 509 |
Stemmer | 395 | 509 |
EGFP | 488 | 509 |
GFP-S65T | 489 | 509 |
Y66H | 382 | 459 |
EBFP | 380 | 460 |
YFP激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)
黃色熒光蛋白(Yellow Fluorescent Protein ,YFP)可以看做綠色熒光蛋白的一種突變體,來(lái)源于維多利亞多管水母( Aequorea victoria)。相對(duì)于綠色熒光蛋白,其熒光向紅色光譜偏移,而這主要是由于蛋白203位蘇氨酸變?yōu)槔野彼帷F涓蠹ぐl(fā)波長(zhǎng)為514 nm,更大發(fā)射波長(zhǎng)為527 nm。excitation wavelength and the emission wavelength for yfp.
Yellow Fluorescent Proteins Excitation Emission
如何能觀測(cè)YFP黃色熒光蛋白的表達(dá)?
美國(guó)路陽(yáng)生產(chǎn)有多款便攜式激發(fā)光源,無(wú)需熒光顯微鏡就能輕松觀察篩選黃色熒光蛋白表達(dá)陽(yáng)性。LUYOR-3260CY便攜式Y(jié)FP激發(fā)光源能直接分選YFP表達(dá)陽(yáng)性的植株,能夠分選愈傷組織、植株、種子、菌落等。如欲進(jìn)一步了解便攜式熒光蛋白激發(fā)光源,可直接聯(lián)系上海峰志儀器有限公司的銷售客服。
上圖為黃色熒光蛋白(YFP)在線蟲上的表達(dá)(體視顯微鏡熒光適配器下觀察效果)
上圖為GFP在煙草葉片的表達(dá)(LUYOR-3415RG激發(fā)光源照射下觀察的效果)
Yellow Fluorescent Proteins/常用黃色熒光蛋白的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)
YFP種類 | Excitation 激發(fā)光波長(zhǎng)(nm) | Emission發(fā)射光波長(zhǎng)(nm) |
EYFP | 514 | 527 |
Topaz | 514 | 527 |
Venus | 515 | 528 |
mCitrine | 516 | 529 |
YPet | 517 | 530 |
TagYFP | 508 | 524 |
PhiYFP | 525 | 537 |
ZsYellow1 | 529 | 539 |
mBanana | 540 | 553 |
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