GFP激發(fā)光源(EGFP激發(fā)光源)又叫綠色熒光蛋白激發(fā)光源、GFP激發(fā)光源是用于激發(fā)熒光蛋白發(fā)出熒光,通過便攜式熒光蛋白激發(fā)光源方便快捷觀察目的基因通過載體有沒有表達成功的檢測方法。市場有多家進口GFP激發(fā)光源,為什么大家喜歡LUYOR-3415這款呢?
LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)光源觀察熒光蛋白的表達位置真心很方便,可以直接用于分選水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、擬南芥的轉(zhuǎn)基因種子。能夠觀察BFP藍色熒光蛋白、GFP、EGFP綠色熒光蛋白、YFP黃色熒光蛋白、RFP、DsRed、mcherry、Tdtomato紅色熒光蛋白。美國LUYOR公司生產(chǎn)的LUYOR-3415RG雙波長激發(fā)光源,可以激發(fā)GFP和dsRed的發(fā)出熒光。
轉(zhuǎn)基因光源/GFP熒光激發(fā)光源性能對比
經(jīng)常有客戶咨詢luyor-3415系列轉(zhuǎn)基因光源和其他光源對比優(yōu)勢在哪里,現(xiàn)把和進口品牌某一型號的性能對比列表如下,僅供參考!
對比項目 | LUYOR-3415 | DFP-X |
光源 | 同一波段6顆光源激發(fā),照射面積大,激發(fā)熒光亮度高 | 單顆光源,照射面積小,熒光亮度低 |
電池 | 充電電池組供電,充滿電能夠連續(xù)工作6-9小時 | 干電池供電,要經(jīng)常更換電池,采購、更換電池不方便 |
電源 | 可用110-220v電源適配器連續(xù)供電,適合長時間篩選。 | 無法滿足 |
支架 | 可選配臺式可調(diào)節(jié)支架,解放雙手,觀察方便 | 必須手持觀察 |
保修 | 全免費保修3年,在上海設(shè)有服務(wù)中心 | 保修壹年,出問題返回美國維修 |
試機 | 在中國多個城市設(shè)有代理店,提供免費試機,試用滿意付款 | 無法實現(xiàn) |
貨期 | 常規(guī)型號在國內(nèi)備有充足庫存 | 需要訂貨,貨期周期長。 |
LUYOR-3415照射下觀察GFP在煙草上的表達(圖片由LUYOR-3415用戶提供,圖片版權(quán)歸屬上海路陽生物技術(shù)有限公司,嚴禁盜用。)
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GFP熒光的激發(fā)光波長和發(fā)射光波長
GFP熒光的激發(fā)光波長和GFP的發(fā)射光波長因GFP的種類不一樣,會有差別。
GFP綠色熒光蛋白在分子和細胞生物學中的應(yīng)用越來越多。由于應(yīng)用的多樣性,已經(jīng)開發(fā)出形成原始野生型綠色熒光蛋白(wtGFP)的幾種變體。這些變體中的幾個具有與wtGFP不同的激發(fā)和發(fā)射光譜。
wtGFP綠色熒光蛋白zui常用的突變可分為三類:
(1)紅移變體;
(2)像變體一樣的野生型;
(3)藍色發(fā)射變體。
如圖1所示,以EGFP為代表的紅移變體具有一個集中在約488 nm處的單個激發(fā)峰,發(fā)射峰波長為509 nm。類似野生型的變體的主要激發(fā)峰位于395 nm,發(fā)射峰位于509 nm,而發(fā)出藍色的突變體通常在380 nm附近有一個激發(fā)峰,在460 nm附近有一個發(fā)射峰(圖1)。
表1.GFP fluorescent protein變體的激發(fā)和發(fā)射數(shù)據(jù)
GFP Variant | Excitation max (nm) | Emission max (nm) |
wtGFP | 395 | 509 |
GFPuV | 395 | 509 |
Stemmer | 395 | 509 |
EGFP | 488 | 509 |
GFP-S65T 、 | 489 | 509 |
Y66H | 382 | 459 |
EBFP | 380 | 460 |
YFP的激發(fā)光波長和發(fā)射光波長
YFP激發(fā)波長為510nm(Excitation),更大發(fā)射波長為527 nm
黃色熒光蛋白(Yellow Fluorescent Protein ,YFP)可以看做綠色熒光蛋白的一種突變體,zui初來源于維多利亞多管水母( Aequorea victoria)。相對于綠色熒光蛋白,其熒光向紅色光譜偏移,而這主要是由于蛋白203位蘇氨酸變?yōu)槔野彼?。其更大激發(fā)波長為514 nm,更大發(fā)射波長為527 nm。excitation wavelength and the emission wavelength for yfp.
Yellow Fluorescent Proteins Excitation Emission
tdtomato fluorescent protein紅色熒光蛋白的激發(fā)光波長
tdtomato熒光蛋白是屬于一種紅色熒光蛋白,可以用520nm的綠光激發(fā)(Excitation),發(fā)射出的熒光為紅色。
tdtomato紅色熒光蛋白的激發(fā)光譜圖
RFP紅色熒光蛋白激發(fā)波長
Red fluorescent protein簡稱RFP,RFP紅色熒光蛋白的激發(fā)光峰值為532nm(Excitation),RFP紅色熒光蛋白的熒光峰值為588nm。
常規(guī)紅色熒光蛋白分為橙色熒光蛋白(550-570 nm),紅色熒光蛋白(570-620 nm)和遠紅外熒光蛋白(>620 nm)3 種。mCherry是作為標簽的好選擇,因為它的光穩(wěn)定性更強并且其具備良好的單體特性,細胞毒性低。DsRed是一種從珊瑚中分離出來的紅色熒光蛋白,具有熒光強、穩(wěn)定性好等優(yōu)勢。但其本身也存在許多問題。例如,DsRed 寡聚狀態(tài)是四聚體,在進行蛋白融合時容易形成多聚影響目標蛋白,DsRed 在細胞內(nèi)表達會產(chǎn)生毒性。
Red fluorescent protein (RFP) is a versatile biological marker for monitoring physiological processes, visualizing protein localization, and detecting transgenic expression in vivo. RFP can be excited by the 488 nm or 532 nm laser line and is optimally detected at 588 nm.
RFP紅色熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光光譜圖(Excitation Emission)
mCarmine紅色熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光光譜圖
dsred紅色熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光光譜圖
mcherry紅色熒光蛋白的吸收/發(fā)射峰分別位于587nm和610nm,
常用熒光蛋白的激發(fā)和發(fā)射波長:
EBFP2,藍色熒光蛋白,激發(fā)波長383nm,發(fā)射波長448nm;
mCelulean,青色熒光蛋白,激發(fā)波長433nm,發(fā)射波長475nm;
EGFP,綠色熒光蛋白,激發(fā)波長488nm,發(fā)射波長507nm;
EYFP,黃色熒光蛋白,激發(fā)波長513nm,發(fā)射波長527nm;
mCitrine,黃色熒光蛋白,激發(fā)波長516nm,發(fā)射波長529nm;
mCherry,紅色熒光蛋白,激發(fā)波長587nm,發(fā)射波長610nm;
mRuby2,紅色熒光蛋白,激發(fā)波長559nm,發(fā)射波長600nm;
tdTomato,橙色熒光蛋白,激發(fā)波長554nm,發(fā)射波長581nm;
mcherry激發(fā)波長(Excitation Emission)
mcherry Fluorescent Proteins Excitation Emission
mCherry是一種來自于蘑菇珊瑚(mushroom coral)的紅色熒光蛋白,常有于標記和示蹤某些分子和細胞組分。相對于其他熒光,mcherry的好處在于它的顏色和應(yīng)用zui多的綠色熒光蛋白(GFP)能進行共同標記,并且mcherry相對于其他單體熒光蛋白來說也具有卓越的光穩(wěn)定型。
吸收和發(fā)射波長:
mcherry的更大吸收/發(fā)射峰分別位于587nm和610nm,對光致漂白耐受,熒光非常穩(wěn)定。
實驗室常見熒光蛋白的激發(fā)波長和發(fā)射波長
紫外熒光蛋白UV fluorescent protein
Protein | Excitation Wavelength | Emission Wavelength |
---|---|---|
Sirius | 355 | 424 |
Sandercyanin | 375 | 630 |
shBFP-N158S/L173I | 375 | 458 |
藍色熒光蛋白Blue fluorescent protein
Protein | Excitation Wavelength | Emission Wavelength |
---|---|---|
Azurite | 383 | 450 |
EBFP2 | 383 | 448 |
mKalama1 | 385 | 456 |
mTagBFP2 | 399 | 454 |
TagBFP | 402 | 457 |
shBFP | 401 | 458 |
青色熒光蛋白Cyan fluorescent protein
Protein | Excitation Wavelength | Emission Wavelength |
---|---|---|
ECFP | 433 | 475 |
Cerulean | 433 | 475 |
mCerulean3 | 433 | 475 |
SCFP3A | 433 | 474 |
CyPet | 435 | 477 |
mTurquoise | 434 | 474 |
mTurquoise2 | 434 | 474 |
TagCFP | 458 | 480 |
mTFP1 | 462 | 492 |
monomeric Midoriishi-Cyan | 470 | 496 |
Aquamarine | 430 | 474 |
綠色熒光蛋白Green fluorescent protein
Protein | Excitation Wavelength | Emission Wavelength |
---|---|---|
TurboGFP | 482 | 502 |
TagGFP2 | 483 | 506 |
mUKG | 483 | 499 |
Superfolder GFP | 485 | 510 |
Emerald | 487 | 509 |
EGFP | 488 | 507 |
Monomeric Azami Green | 492 | 505 |
mWasabi | 493 | 509 |
Clover | 505 | 515 |
mNeonGreen | 506 | 517 |
NowGFP | 494 | 502 |
mClover3 | 506 | 518 |
黃色熒光蛋白Yellow fluorescent protein
Protein | Excitation Wavelength | Emission Wavelength |
---|---|---|
TagYFP | 508 | 524 |
EYFP | 513 | 527 |
Topaz | 514 | 527 |
Venus | 515 | 528 |
SYFP2 | 515 | 527 |
Citrine | 516 | 529 |
Ypet | 517 | 530 |
lanRFP-ΔS83 | 521 | 592 |
mPapaya1 | 530 | 541 |
mCyRFP1 | 528 | 594 |
桔色熒光蛋白Orange fluorescent protein
Protein | Excitation Wavelength | Emission Wavelength |
---|---|---|
Monomeric Kusabira-Orange | 548 | 559 |
mOrange | 548 | 562 |
mOrange2 | 549 | 565 |
mKOκ | 551 | 563 |
mKO2 | 551 | 565 |
紅色熒光蛋白Red fluorescent protein
Protein | Excitation Wavelength | Emission Wavelength |
---|---|---|
TagRFP | 555 | 584 |
TagRFP-T | 555 | 584 |
RRvT | 556 | 583 |
mRuby | 558 | 605 |
mRuby2 | 559 | 600 |
mTangerine | 568 | 585 |
mApple | 568 | 592 |
mStrawberry | 574 | 596 |
FusionRed | 580 | 608 |
mCherry | 587 | 610 |
mNectarine | 558 | 578 |
mRuby3 | 558 | 592 |
mScarlet | 569 | 594 |
mScarlet-I | 569 | 593 |
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