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文獻里面的熒光照片是用什么燈拍攝的?

作者:上海 時間:2022-09-06 07:53:34瀏覽2138 次

信息摘要:

經(jīng)常有同學咨詢,看到文獻里面很多熒光蛋白的照片非常漂亮,不知道怎么拍攝,上海峰志儀器有限公司的技術(shù)工程師將熒光蛋白表達的拍攝方法給大家說一下,供大家參考。

經(jīng)常有同學咨詢,看到文獻里面很多熒光蛋白的照片非常漂亮,不知道怎么拍攝,上海峰志儀器有限公司的技術(shù)工程師將熒光蛋白表達的拍攝方法給大家說一下,供大家參考。

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上圖:紅色熒光蛋白在愈傷上的表達

熒光蛋白表達的拍攝工具:

  1. 光源:光源用于激發(fā)熒光蛋白發(fā)出熒光,如果視野很大,建議購買LUYOR-3415系列GFP激發(fā)光源,這款照射面積大,激發(fā)熒光亮度高,拍攝效果非常好。

  2. 單反相機:常規(guī)的單反相機均可。

  3. 拍照濾鏡:根據(jù)拍攝的熒光蛋白種類,要選擇合適的熒光蛋白拍照濾鏡,拍照濾鏡是將激發(fā)光源的激發(fā)光過濾掉,讓熒光蛋白的熒光通過,這樣單反相機就能呈現(xiàn)精美的熒光照片。

  4. 暗室:因環(huán)境明亮光線,影響大熒光的拍攝,拍攝周圍光線越暗,拍攝效果約好,如果沒有暗室,可以選擇夜晚拍攝。

熒光蛋白表達的拍攝技巧:

  1. 將單反相機檔位撥到手動檔位(M檔),調(diào)整光圈、ISO、和快門速度三個參數(shù)到合適值。

  2. 將選擇好的熒光蛋白拍照濾鏡安裝到單反相機鏡頭上。

  3. 將LUYOR-3415系列GFP激發(fā)光源安裝到臺式支架上,打開光源開關(guān)。

  4. 調(diào)整合適角度,相機對焦到拍攝目標上,拍攝即可。

說明:

如果是拍攝葉片上的GFP或eGFP的表達,葉片上的葉綠素在450nm激發(fā)光照射下會發(fā)出強烈的紅色熒光,如果GFP或eGFP的表達量不高的話,會拍攝不到熒光蛋白的表達,這時候建議不用LUV-495A拍照濾鏡,用LUV-520A綠色濾鏡拍攝,LUV-520A綠色濾鏡只允許綠色波段通過,葉綠素熒光被隔離掉了。

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